Conceptos básicos de los ELISA Kits

Los kits ELISA(Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay) han convertido en una herramienta fundamental en el ámbito de la investigación biomédica.

Estos kits se utilizan para la detección y cuantificaciónde sustancias específicas en muestras biológicas, como proteínas, péptidos y hormonas. Esto se consigue a partir de un anticuerpoenlazado a una enzima, la cual reaccionará después de añadir algún sustrato, dando lugar a un cambio de color. Este cambio se medirá con espectrofotometría y revelará la presencia de la sustancia que buscábamos y, además, nos permitirá cuantificarla.

Así pues, los principales componentesde un kit son:

1. Placa de Microtitulación: Base sólida que contiene pocillos para alojar las muestras y reactivos.


2. Anticuerpos:Proteína producida por el sistema inmunitario de un organismo cuando detecta sustancias extrañas, llamadas antígenos (que es lo que buscaremos detectar con el kit). Dependerá del tipo de ensayo, pero, normalmente, estos anticuerpos (específicos para detectar la sustancia de interés) están inmovilizados en la placa.


3. Enzima:Una enzima es una proteína que actúa como un catalizador biológico acelerando la velocidad de una reacción química específica en la célula. En los kits ELISA, esta está unida a los anticuerpos y se encargará de producir una señal detectable cuando estos se unan a la substancia buscada.


4. Sustrato Cromogénico o Fluorogénico: Se usan como sustratos de las enzimas unidas a los anticuerpos. Son moléculas solubles incoloras que constan de un cromóforo (un grupo químico que cambia de color tras la reacción enzimática).


5. Soluciones de Lavado: Eliminan los reactivos no unidos a la placa.

Conocer los principales componentes de un kit ELISA nos ayuda a comprender los pasos básicos de la técnica:

1. Coating:Se añade a los pocillos de la placa la muestra biológica en la que se encuentra la sustancia a detectar.


2. Bloqueo: Paso que evita la unión no específica de otras sustancias en las paredes de los pocillos.


3. Incubación con la Muestra: Se añade la solución de anticuerpos conjugados con la enzima y se incuban con la muestra biológica. Estos anticuerpos se unirán a la sustancia que queramos detectar.


4. Lavado:Se eliminan las sustancias no unidas.


5. Incubación con el Conjugado Enzimático:Se añade el sustrato cromogénico para que reaccione con las enzimas y así poder marcar la sustancia de interés.


6. Lavado:Se eliminan residuos no deseados.


7. Reacción Cromogénica o Fluorogénica:Se produce la señal detectable.


8. Lectura de Resultados: La intensidad de color o fluorescencia se mide y se relaciona con la concentración de la sustancia en la muestra.

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Estos kits tienen varias aplicaciones en campos como:

• Medicina:Se usan para diagnosticar si un paciente tiene alguna infección o alguna enfermedad autoinmune. Por ejemplo, algunas pruebas que se realizan mediante esta técnica son las de la proteína TAU (diagnóstico del Alzheimer o para análisis de la presencia de anticuerpos IgM e IgG frente al virus SAR-CoV-2).


• Veterinaria:La técnica ELISA es ampliamente utilizada para la detección y diagnóstico de enfermedades que afectan al ganado, aves o animales de compañía.


• Industria alimentaria:Los kits ELISA se usan de forma habitual para la detección de alérgenos (gluten, huevo, soja, frutos secos, etc.) en alimentos.

Tal y como hemos visto, los Kits ELISA son herramientas versátiles y cuentan con un amplio rango de aplicaciones. Así pues, aprovechamos para recordarles que en nuestro catálogo pueden encontrar más de 8000 kits ELISA en nuestra nueva línea ELK Biotechnology, listos para usar con una alta especificidad y precisión.