Concepts de base des Kits ELISA

Les kits ELISA(Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay) sont devenus des outils fondamentaux dans le domaine de la recherche biomédicale.

Ces kits sont utilisés pour la détection et la quantificationde substances spécifiques dans des échantillons biologiques, telles que des protéines, peptides et hormones. Cela est réalisé à l'aide d'un anticorpslié à une enzyme, qui réagira après l'ajout d'un substrat, entraînant un changement de couleur. Ce changement est mesuré par spectrophotométrie et révélera la présence de la substance recherchée, ainsi que permettra de la quantifier.

Ainsi, les principaux composantsd'un kit sont :

1. Plaque de microtitration: Base solide contenant des puits pour accueillir les échantillons et les réactifs.


2. Anticorps: Protéine produite par le système immunitaire d'un organisme lorsqu'il détecte des substances étrangères, appelées antigènes (que nous chercherons à détecter avec le kit). Selon le type de test, ces anticorps (spécifiques pour détecter la substance d'intérêt) sont généralement immobilisés sur la plaque.


3. Enzyme: Une enzyme est une protéine agissant comme un catalyseur biologique, accélérant la vitesse d'une réaction chimique spécifique dans la cellule. Dans les kits ELISA, elle est liée aux anticorps et sera responsable de produire un signal détectable lorsque ceux-ci se lient à la substance recherchée.


4. Substrat chromogène ou fluorogène: Utilisé comme substrat des enzymes liées aux anticorps. Ce sont des molécules solubles incolores composées d'un chromophore (un groupe chimique changeant de couleur après la réaction enzymatique).


5. Solutions de lavage: Éliminent les réactifs non liés à la plaque.

Connaître les principaux composants d'un kit ELISA nous aide à comprendre les étapes de base de la technique :

1. Revêtement :La solution biologique contenant la substance à détecter est ajoutée aux puits de la plaque.


2. Blocage: Étape empêchant l'union non spécifique d'autres substances sur les parois des puits.


3. Incubation avec l'échantillon: La solution d'anticorps conjugués à l'enzyme est ajoutée et incubée avec l'échantillon biologique. Ces anticorps se lieront à la substance que nous voulons détecter.


4. Lavage: Élimination des substances non liées.


5. Incubation avec le conjugué enzymatique: Le substrat chromogène est ajouté pour réagir avec les enzymes et permettre de marquer la substance d'intérêt.


6. Lavage: Élimination des résidus indésirables.


7. Réaction chromogène ou fluorogène: Production du signal détectable.


8. Lecture des résultats: L'intensité de couleur ou de fluorescence est mesurée et est liée à la concentration de la substance dans l'échantillon.

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Ces kits ont plusieurs applications dans des domaines tels que :

• Médecine: Ils sont utilisés pour diagnostiquer si un patient a une infection ou une maladie auto-immune. Par exemple, certaines analyses réalisées par cette technique incluent la protéine TAU (diagnostic de la maladie d'Alzheimer ou analyse de la présence d'anticorps IgM et IgG contre le virus SAR-CoV-2).


• Vétérinaire: La technique ELISA est largement utilisée pour la détection et le diagnostic de maladies affectant le bétail, les oiseaux ou les animaux de compagnie.


• Industrie alimentaire: Les kits ELISA sont couramment utilisés pour la détection d'allergènes (gluten, œuf, soja, fruits à coque, etc.) dans les aliments.

Comme nous l'avons vu, les kits ELISA sont des outils polyvalents avec une large gamme d'applications. Nous en profitons pour vous rappeler que dans notre catalogue, vous pouvez trouver plus de 8000 kits ELISA dans notre nouvelle ligne ELK Biotechnology, prêts à être utilisés avec une haute spécificité et précision.