Concetti di base dei Kit ELISA

I kit ELISA(Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay) si sono trasformati in uno strumento fondamentale nel campo della ricerca biomedica.

Questi kit vengono utilizzati per la rivelazione e la quantificazionedi sostanze specifiche in campioni biologici, come proteine, peptidi ed ormoni. Ciò avviene grazie a un anticorpolegato a un' enzima, che reagirà dopo l'aggiunta di un substrato, provocando un cambiamento di colore. Questo cambiamento verrà misurato con uno spettrofotometro e rivelerà la presenza della sostanza cercata, consentendo anche di quantificarla.

Quindi, i componenti principalidi un kit sono:

1. Piastra di Microtitolazione: Base solida che contiene pozzetti per ospitare campioni e reagenti.


2. Anticorpi:Proteine prodotte dal sistema immunitario di un organismo quando rileva sostanze estranee, chiamate antigeni (che è ciò che cercheremo di rilevare con il kit). A seconda del tipo di test, di solito questi anticorpi (specifici per rilevare la sostanza di interesse) sono immobilizzati sulla piastra.


3. Enzima:Un'enzima è una proteina che agisce come catalizzatore biologico, accelerando la velocità di una specifica reazione chimica nella cellula. Nei kit ELISA, questa è legata agli anticorpi e si occupa di produrre un segnale rilevabile quando questi si legano alla sostanza cercata.


4. Substrato Cromogenico o Fluorogenico: Vengono utilizzati come substrati delle enzimi legate agli anticorpi. Sono molecole solubili incolori che contengono un cromoforo (un gruppo chimico che cambia colore dopo la reazione enzimatica).


5. Soluzioni di Lavaggio: Eliminano i reagenti non legati alla piastra.

Conoscere i componenti principali di un kit ELISA ci aiuta a comprendere i passaggi di base della tecnica:

1. Coating:Si aggiunge ai pozzetti della piastra il campione biologico in cui si trova la sostanza da rilevare.


2. Blocco: Passaggio che impedisce l'unione non specifica di altre sostanze sulle pareti dei pozzetti.


3. Incubazione con il Campione: Si aggiunge la soluzione di anticorpi coniugati con l'enzima e si incubano con il campione biologico. Questi anticorpi si legheranno alla sostanza che vogliamo rilevare.


4. Lavaggio:Si eliminano le sostanze non legate.


5. Incubazione con il Coniugato Enzimatico:Si aggiunge il substrato cromogenico per reagire con gli enzimi e marcare la sostanza di interesse.


6. Lavaggio:Si eliminano i residui indesiderati.


7. Reazione Cromogenica o Fluorogenica:Si produce il segnale rilevabile.


8. Lettura dei Risultati: L'intensità del colore o della fluorescenza viene misurata e correlata alla concentrazione della sostanza nel campione.

IMMAGINE

Questi kit hanno diverse applicazioni in campi come:

• Medicina:Sono utilizzati per diagnosticare se un paziente ha un'infezione o una malattia autoimmune. Ad esempio, alcuni test eseguiti con questa tecnica includono la proteina TAU (diagnosi dell'Alzheimer o analisi della presenza di anticorpi IgM e IgG contro il virus SAR-CoV-2).


• Veterinaria:La tecnica ELISA è ampiamente utilizzata per la rilevazione e la diagnosi di malattie che colpiscono il bestiame, gli uccelli o gli animali domestici.


• Industria Alimentare:I kit ELISA sono comunemente usati per la rilevazione di allergeni (glutine, uovo, soia, frutta a guscio, ecc.) negli alimenti.

Come abbiamo visto, i Kit ELISA sono strumenti versatili e hanno un ampio campo di applicazioni. Pertanto, approfittiamo per ricordarvi che nel nostro catalogo potete trovare oltre 8000 kit ELISA nella nostra nuova linea ELK Biotechnology, pronti per l'uso con alta specificità e precisione.