Conceitos Básicos dos Kits ELISA

Os kits ELISA(Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay) tornaram-se uma ferramenta fundamental no campo da pesquisa biomédica.

Esses kits são utilizados para a detecção e quantificaçãode substâncias específicas em amostras biológicas, como proteínas, peptídeos e hormônios. Isso é realizado por meio de um anticorpoligado a uma enzima, a qual reagirá após a adição de algum substrato, resultando em uma mudança de cor. Essa alteração será medida por espectrofotometria e revelará a presença da substância desejada, permitindo também quantificá-la.

Portanto, os principais componentesde um kit são:

1. Placa de Microtitulação: Base sólida que contém poços para acomodar as amostras e reagentes.


2. Anticorpos:Proteína produzida pelo sistema imunológico de um organismo quando detecta substâncias estranhas, chamadas antígenos (que é o que procuramos detectar com o kit). Dependendo do tipo de ensaio, esses anticorpos (específicos para detectar a substância de interesse) geralmente estão imobilizados na placa.


3. Enzima:Uma enzima é uma proteína que atua como um catalisador biológico, acelerando a velocidade de uma reação química específica na célula. Nos kits ELISA, ela está ligada aos anticorpos e será responsável por produzir um sinal detectável quando estes se ligarem à substância procurada.


4. Substrato Cromogênico ou Fluorogênico: São usados como substratos das enzimas ligadas aos anticorpos. São moléculas solúveis e incolores que contêm um cromóforo (um grupo químico que muda de cor após a reação enzimática).


5. Soluções de Lavagem: Eliminam os reagentes não ligados à placa.

Conhecer os principais componentes de um kit ELISA ajuda a compreender os passos básicos da técnica:

1. Revestimento:A amostra biológica contendo a substância a ser detectada é adicionada aos poços da placa.


2. Bloqueio: Etapa que impede a união não específica de outras substâncias nas paredes dos poços.


3. Incubação com a Amostra: Adiciona-se a solução de anticorpos conjugados com a enzima e incuba-se com a amostra biológica. Esses anticorpos se ligarão à substância que desejamos detectar.


4. Lavagem:Eliminam-se as substâncias não ligadas.


5. Incubação com o Conjugado Enzimático:Adiciona-se o substrato cromogênico para reagir com as enzimas e marcar a substância de interesse.


6. Lavagem:Eliminam-se resíduos indesejados.


7. Reação Cromogênica ou Fluorogênica:Gera-se o sinal detectável.


8. Leitura de Resultados: A intensidade de cor ou fluorescência é medida e relacionada à concentração da substância na amostra.

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Esses kits têm várias aplicações em campos como:

• Medicina:São usados para diagnosticar se um paciente possui alguma infecção ou doença autoimune. Por exemplo, alguns testes realizados por essa técnica incluem a proteína TAU (diagnóstico do Alzheimer ou análise da presença de anticorpos IgM e IgG contra o vírus SAR-CoV-2).


• Veterinária:A técnica ELISA é amplamente utilizada para a detecção e diagnóstico de doenças que afetam o gado, aves ou animais de estimação.


• Indústria alimentícia:Os kits ELISA são comumente usados para detectar alérgenos (glúten, ovo, soja, nozes, etc.) em alimentos.

Como visto, os Kits ELISA são ferramentas versáteis com uma ampla gama de aplicações. Aproveitamos para lembrar que em nosso catálogo você pode encontrar mais de 8000 kits ELISA em nossa nova linha ELK Biotechnology, prontos para uso com alta especificidade e precisão.